东方马脑炎（Eastern equine encephalitis，EEE）是由东方马脑炎病毒（Eastern equine encephalitis virus，EEEV）经虫媒传播引起的人兽共患病，可导致马、人类及其他脊椎动物发生 严重神经系统疾病甚至死亡，对马养殖业发展和人类公共卫生安全构成严重威胁。近年来， 全球多地相继出现EEEV感染病例，为疫情防控敲响警钟。疫苗接种是预防该病的关键手段， 但目前尚无预防性疫苗获批上市。该文综述近年来EEEV疫苗的研究方向与进展，旨在为该 病毒疫苗研发及相关疫病防控提供参考。

为建立一种行之有效地检测新型鹅星状病毒（Novel Goose Astrovirus，NGAstV）基因 1型（NGAstV-1）和基因2型（NGAstV-2）双重荧光定量PCR（quantitative polymerase chain reaction，qPCR），该研究根据NGAstV-1 和NGAstV-2 的ORF2 蛋白设计鉴定引物，建立SYBR Green I的双重qPCR检测方法并用36份疑似感染NGAstV-1和NGAstV-2的雏鹅肝及肾组织样 品进行评估。试验结果显示qPCR相关系数为0.997，对鸭坦布苏病毒（duck tembusu virus，DT- MUV）、番鸭呼肠孤病毒（muscovy duck reovirus，MDRV）、新型鸭呼肠孤病毒（novel duck reovi? rus，NDRV）、禽流感病毒（avian influenza virus，AIV）、禽腺病毒（fowl adenovirus，FAdV）、鹅细小 病毒（goose parvovirus，GPV）扩增结果均为阴性；最低检测限度为1.12×101 copies/μL；重复性试 验结果显示：组间变异系数小于0.8%，组内变异系数小于0.5%，具有良好重复性。由此可知， 该qPCR可高效、特异地检测NGAstV?1和NGAstV?2，为NGAstV监控提供切实可行的方法。

鹅呼肠孤病毒（Goose reovirus, GRV）包括经典型（GRV）和新型鹅呼肠孤病毒（Novel Goose reovirus, NGRV），两者在流行病学特征和病毒基因序列上存在差异。目前针对这两种类 型病毒的敏感、特异的检测方法尚未完善，使得准确诊断和及时干预变得十分困难。为了区分 GRV和NGRV，建立了一种基于染料法（SYBR Green I）的双重RT?qPCR检测方法。结果显示： 该方法通过熔解曲线可区分GRV（79.5℃）和NGRV（86.5℃），对常见的水禽流行疫病均未出现 扩增，最低检出为6.466×101拷贝/μLGRV和4.979×101拷贝/μLNGRV，组内与组间变异系数均 小于0.55%。结果表明，这个研究所建立基于染料法的双重RT?qPCR检测方法可以快速准确 地确定感染鹅群中不同型的GRV，为疾病的早期诊断、流行病学监测和有效防控提供支持。

近年来，随着畜牧兽医行业的发展和人民卫生水平的提高，核酸检测起着越来越重要的作用，即时检测在兽医实践中的需求十分迫切。重组酶聚合酶等温扩增（RPA）和重组酶介导扩增技术（RAA）是近年发展起来的核酸恒温扩增技术，可与侧向流层析等多种技术相结合，实现恒定温度下的快速检测。相对于PCR等传统方法，RPA和RAA具有操作简单快速、不易交叉污染、不需要大型仪器、结果判定简单明确、利于基层应用的优点，因而在兽医领域得到了广泛应用。该文对RPA和RAA技术的发展和在兽医领域的应用进行了综述。